Nanotecnologia Farmacêuticahttp://hdl.handle.net/10183/1159692024-03-29T14:03:42Z2024-03-29T14:03:42ZNanocápsulas de núcleo lipídico e nanopartículas de proteína vegetal fluorescentes : estudo de captação em culturas celularesAsbahr, Ana Carolina Cavazzinhttp://hdl.handle.net/10183/2342872022-02-22T07:55:25Z2014-01-01T00:00:00ZNanocápsulas de núcleo lipídico e nanopartículas de proteína vegetal fluorescentes : estudo de captação em culturas celulares
Asbahr, Ana Carolina Cavazzin
A captação de nanocápsulas de núcleo lipídico (LNC) e nanopartículas de proteína de algodão (GONP) foi avaliada em células de câncer de mama MCF7. As GONP foram produzidas por reticulação a partir de concentrado proteico de algodão e cloreto de cálcio. O estudo de pré-formulação revelou que o pH inicial e concentração de reticulante interferem no tamanho e polidispersão das partículas, sendo o sistema mais estável obtido em pH 3,0 e 9 mM de CaCl2. As GONP são esféricas, com superfície levemente rugosa, têm pH de 3,91 ± 0,14, potencial zeta de -20,1 ± 0,608 mV, um diâmetro aproximado de 273,8 ± 12,8 nm (Zave) e PdI de 0,168 ± 0,51 por PCS; 191,5 ± 23,3 nm e Span de 1,93 ± 0,29 por DL e 113,7 nm por MET. A análise de MEVEDS confirmou que os componentes majoritários da estrutura são C, Ca e Cl. Cada mL de suspensão possui 7,00 x 1012 ± 0,2477 partículas. O mecanismo de formação das partículas envolve forças hidrofóbicas e reticulação com íons Ca2+ e sua estabilidade é de 48 h. Para os estudos de captação em células MCF7, foram produzidas GONPf fluorescentes com rod123 e LNCf com PCL covalentemente ligada à roB por deposição interfacial do polímero pré-formado. Os estudos de viabilidade celular por MTT revelaram que GONPf não é tóxica para macrófagos RAW 264.7 e células MCF7 entre 0,152 e 3,056x10-2 m2 de superfície aplicada e LNCf, entre 0,157 e 0,785x10-2 m2, com uma DL50 de 1,02x10-2 m2. A captação das partículas foi avaliada após 24 h de incubação a 37°C/5% CO2 e demonstrou ser dose-dependente. As LNCf são captadas por endocitose mediada por caveolina e as GONPf, por um mecanismo misto envolvendo macropinocitose, endocitose dependente de clatrina e endocitose dependente de caveolina. A presença de tensoativo na superfície das LNCf é a causa provável para a menor captação em relação às GONPf.; Lipid-core nanocapsules (LNC) and Gossypium nanoparticles (GONP) cellular uptake were assessed in breast cancer cells MCF7. GONP were produced by cross-linking a cotton seed proteic concentrate with calcium chloride. Pre-formulation study demonstrated that initial pH and CaCl2 concentration affect the size and polydispersion of nanoparticles. Best result was obtained with pH 3.0 and 9 mM de CaCl2. GONP were spherical, with a slightly rough surface, pH = 3.91 ± 0.14, zeta potential = -20.1 ± 0.608 mV and diameter of 273.8 ± 12.8 nm (Zave) and PdI de 0.168 ± 0.51 measured by PCS; 191.5 ± 23.3 nm and Span 1.93 ± 0.29 measured by laser diffraction and 113.7 ± 10.7 nm measured by TEM. SEM-EDS analysis confirmed that C, Ca e Cl were the main constituent of GONP. Each mL of GONP suspension has 7.00 x 1012 ± 0.2477 particles. Hydrophobic interaction and cross-linking with calcium ions were the basis for GONP formation and the system is stable for 48 h. For cellular uptake studies, fluorescent particles were produced with rhodamine 123 (GONPf). LNCf were prepared by interfacial polymer deposition with PCL covalent linked with rhodamine B. MTT assay showed that GONPf were nontoxic to RAW 264.7 macrophages and MCF7cells in dosis between 0.152 e 3.056x10-2 m2 of applied surface and LNCf, between 0.157 e 0.785x10-2 m2 and LD50 = 1.02x10-2 m2. Nanoparticle uptake was evaluated after 24 h incubation at 37°C/5% CO2 and is dose dependent. LNCf are internalized by caveolin mediated endocytosis. GONPf, on the other hand were internalized by a macropinocytosis, clathrin dependent endocytosis and caveolin dependent endocytosis. Surfactant presence at LCNf surface may contribute to a less extent uptake relative to GONPf.
2014-01-01T00:00:00ZDesenvolvimento de formulações fotoprotetoras contendo filtros solares nanoencapsuladosSantos, Júlia Schererhttp://hdl.handle.net/10183/1159702024-03-14T07:57:19Z2014-01-01T00:00:00ZDesenvolvimento de formulações fotoprotetoras contendo filtros solares nanoencapsulados
Santos, Júlia Scherer
A utilização de nanopartículas poliméricas como carreadores de filtros solares tem sido descrita na literatura, com intuito de possibilitar uma maior retenção desses no estrato córneo. Esse trabalho teve por objetivo desenvolver formulações nanotecnológicas fotoprotetoras a partir de variações na composição do núcleo oleoso e na composição quali-quantitativa dos filtros solares selecionados. Inicialmente, foram preparadas formulações contendo somente metoxicinamato de octila (OMC), afim de determinar a melhor concentração do filtro no núcleo. A análise da estabilidade dessas nanocápsulas mostrou que a menor concentração de OMC foi a ideal para a sua localização preferencial no núcleo. Posteriormente, a essa formulação foi adicionado 16 mg/mL de um óleo adicional, obtendo-se a formulação NC1, a qual apresentou tamanho nanométrico e potencial zeta variando entre -9 e -18 mV. Após a secagem das formulações contendo OMC ou OMC associado ao óleo adicional, a retomada do tamanho nanométrico foi obtida em sua totalidade apenas para a formulação contendo OMC e o óleo adicional. No estudo do gradiente de densidade observou-se que essa mesma formulação, apresentou a menor tendência à mistura de partículas. A formulação NC1 também propiciou maior fotoestabilização do OMC, da mesma forma como a sua respectiva forma pulverulenta. Após incorporação dos nanoinsumos em hidrogéis, os valores de pH, comportamento reológico e características organolépticas obtidas foram adequadas para aplicação tópica. No estudo da capacidade fotoprotetora, a formulação contendo NC1 apresentou melhor desempenho. O hidrogel contendo NC1 também apresentou maior retenção no estrato córneo em ambos os tempos de análise (2 h e 6 h) em relação aos demais hidrogéis contendo somente OMC. Em um estudo final, foram adicionados outros dois filtros solares à formulação NC1, a octiltriazona e bemotrizinol. As formulações apresentaram tamanho de partícula, bem como pH e potencial zeta, adequados. Na análise da estabilidade física das formulações, observou-se que as mesmas mantiveram-se estáveis durante todo o período de análise. No estudo da capacidade fotoprotetora e da capacidade absortiva, a formulação contendo um total de 3 mg/mL de filtros solares encapsulado apresentou melhor desempenho. No estudo de penetração cutânea, esse mesmo semissólido apresentou melhor retenção no estrato córneo após 6 horas em relação ao semissólido contendo os três filtros na forma livre. No estudo avaliando as peles suínas tratadas com as formulações seguida da irradiação em lâmpada UVB, os hidrogéis contendo nanocápsulas (gel contendo NC1 e o gel contendo NC4) foram aqueles que mostraram maior capacidade de evitar os danos provocados pela radiação. Em síntese, esse trabalho demonstrou a superioridade das nanocápsulas desenvolvidas em relação aos hidrogéis não-nanotecnológicos. Também foi demonstrado a possibilidade de encapsulação de mais de um filtro solar no núcleo oleoso das nanocápsulas.; Polymeric nanoparticles containig sunscreens have been developed in several studies mainly to enable greater retention in the stratum corneum. This work aimed to develop photoprotective formulations based on nanotechnology by variyng in the oil core composition and quali-quantitative composition of selected sunscreens. Initially, only formulations containing ethylhexyl methoxycinnamate (EMC) were prepared, in order to determine the optimal concentration of this filter in the nanoparticles core. The stability analysis of these nanocapsules demonstrated that the lower concentration of EMC was the optimal for its core location. To this formulation 16 mg / mL of an additional oil was added, obtaining the NC1 formulation, which had nanometer size and zeta potential ranging between -9 and -18 mV. After drying the formulations containing EMC or EMC associated with additional oil, the resumption of nanometric particle size were obtained in its entirety only for the formulation containing EMC and additional oil. In the study of density gradient, this formulation also showed a lower tendency of particle mixture. The NC1 formulation also provided greater photostabilization of EMC, just as its respective dry form. After incorporation of nanoparticles in hydrogels, the pH values, rheological behavior and organoleptic characteristics were appropriated for topical application. In the study of photoprotective capacity, the formulation containing NC1 presented the best performance. The hydrogel containing NC1 showed greater retention in the stratum corneum for 2 and 6 hours, compared to other hydrogels containing only EMC. In a second study, the sunscreens ethylhexyl triazone and bemotrizinol were added to NC1 formulation. The formulations had suitable particle size as well as pH and zeta potential. In the analysis of physical stability of these formulations, it was observed that they were stable throughout the period of analysis. In the study of photoprotective capacity and absorptive capacity, the formulation containing 3 mg/mL of sunscreens encapsulated showed the best performance. In the study of skin penetration, this semisolid showed better retention in the stratum corneum only after 6 hours compared to semisolid containing three sunscreens in free form. In a study evaluating the porcine skin treated with the formulations and submitted to UVB irradiation, hydrogels containing nanocapsules (hydrogel containing NC1 and hydrogel containing NC4) were those that showed greater capacity to prevent damage caused by radiation. In summary, this study demonstrated the superiority of developed nanocapsules in relation to non-nanotechnology hydrogels. It was also demonstrated the possibility of encapsulation of more than one sunscreen in the oil core of nanocapsules.
2014-01-01T00:00:00Z