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Construction and characterization of a glycoprotein e deletion mutant of bovine herpesvirus type 1.2 strain isolated in Brazil

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Construction and characterization of a glycoprotein e deletion mutant of bovine herpesvirus type 1.2 strain isolated in Brazil

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Título Construction and characterization of a glycoprotein e deletion mutant of bovine herpesvirus type 1.2 strain isolated in Brazil
Outro título Construção e caracterização de uma amostra de BoHV-1.2 isolada no Brasil com uma deleção no gene da glicoproteína E
Autor Franco, Ana Claudia
Rijsewijk, Franciscus Antonius Maria
Flores, Eduardo Furtado
Weiblen, Rudi
Roehe, Paulo Michel
Resumo Este artigo descreve a construção e caracterização de uma amostra de um herpesvírus bovino tipo 1.2a (BoHV-1.2a) que apresenta uma deleção na região genômica que codifica a glicoproteína E (gE). A deleção gênica foi induzida através da co-transfecção de um fragmento de deleção, contendo as regiões 5´e 3´flanqueadoras da gE, com o DNA viral intacto de uma amostra viral isolada de um animal que apresentava doença respiratória. O isolamento do vírus gE negativo (gE-) foi realizado com auxílio da técnica de imunoperoxidase em que foi utilizado como anticorpo primário um anticorpo monoclonal anti-gE. O vírus gE- foi purificado e o DNA isolado desta amostra foi examinado através das técnicas de análise por enzimas de restrição e “Southern blot”. Esta amostra gE- será avaliada como candidata para compor uma vacina diferencial contra a rinotraqueíte infecciosa dos bovinos.
Abstract This paper describes the construction and characterization of a Brazilian strain of bovine herpesvirus type 1.2a (BoHV-1.2a) with a deletion of the glycoprotein E (gE) gene. The deletion was introduced by cotransfection of a deletion fragment containing the 5´and 3´gE flanking regions and genomic DNA of wild type BoHV-1 into bovine cells. Isolation of gE deletion mutant was performed by immunoperoxidase staining with an anti-gE monoclonal antibody. Viral clones were plaque purified and further examined by restriction endonuclesase digestion and Southern blot hybridization. This gE deletion mutant will be evaluated as a vaccinal virus, in order to determine its potential use for a differential vaccine.
Contido em Brazilian journal of microbiology. São Paulo, SP. Vol. 33, n. 3 (jul./set. 2002), p. 274-278
Assunto Herpesvírus bovino
Virologia
[en] BoHV-1
[en] Deletion mutant
[en] Differential vaccine
[en] Infectious bovine rhinotracheitis
[en] Infectious pustular vulvovaginitis
Origem Nacional
Tipo Artigo de periódico
URI http://hdl.handle.net/10183/19783
Arquivos Descrição Formato
000413593.pdf (54.90Kb) Texto completo (inglês) Adobe PDF Visualizar/abrir

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