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Padronização da atividade total da glutamato descarboxilase em cérebro de ratos

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Padronização da atividade total da glutamato descarboxilase em cérebro de ratos

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Título Padronização da atividade total da glutamato descarboxilase em cérebro de ratos
Autor Mussulini, Ben Hur Marins
Orientador Oliveira, Diogo Losch de
Co-orientador Wofchuk, Susana Tchernin
Data 2010
Nível Graduação
Instituição Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Instituto de Ciências Básicas da Saúde. Curso de Biomedicina.
Assunto Cérebro
Córtex cerebral
Glutamato descarboxilase
Hipocampo
Resumo O ácido γ-aminobutirico (GABA) é o principal neurotransmissor inibitório do sistema nervoso central (SNC) de mamíferos. A sua síntese é mediante a uma reação catalítica envolvendo a descarboxilação do glutamato através da atividade da glutamato descarboxilase (GAD). O Objetivo deste estudo foi padronizar uma técnica capaz de medir a atividade total da GAD, utilizando córtex e hipocampo de ratos. Neste processo, utilizou-se 65 ratos wistar machos (200-300g de peso). Todas as reações foram realizadas sobre as condições de pH 6,4 e temperatura a 37°. O princípio da técnica basea-se na atividade total oxidativa do homogenato, subtraindo-se a oxidação da GAD inibida por penicilinamina. Quatro variáveis foram levadas em consideração, atividade radioativa específica, diluição do tecido, tempo de reação e gradiente de substrato. A menor atividade radioativa específica obtida foi com 0,05 uCi [C-14(U)]Glu, sendo de 0,305 ± 0,022 nmol CO2/mg/h. A melhor condição de diluição para o hipocampo foi 1:20 p/v e para córtex foi 1:10 p/v. O melhor tempo de reação para ambas as estruturas foi de 1h. Vmax e Km aparente foi de 1,252 nmol CO2/mg/h e 25,55, e 0,902 nmol CO2/mg/h e 15,87, para hipocampo e córtex, respectivamente. Nosso estudo demonstrou que é possível obter-se medidas replicáveis e confiáveis da atividade específica da GAD, utilizando-se apenas hipocampo e córtex provenientes de um hemisfério cerebral.
Tipo Trabalho de conclusão de graduação
URI http://hdl.handle.net/10183/39521
Arquivos Descrição Formato
000821483.pdf (528.8Kb) Texto completo Adobe PDF Visualizar/abrir

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