Avaliação da resistência antimicrobiana e pesquisa de genes de virulência em amostras de Pasteurella multocida isoladas de aves

Abstract

A necessidade de otimizar o uso dos recursos disponíveis, além de manter a competitividade no setor avícola justificam o emprego do sistema atual de criação baseado em altas densidades populacionais. Contudo, a elevada concentração de aves por unidade de área torna os lotes mais suscetíveis a infecções por organismos patogênicos e à propagação destes, através de diferentes unidades de produção. Estas características de criação associadas a condições sanitárias precárias são fatores primordiais para que doenças como a cólera aviária (CA) causada pela bactéria Pasteurella multocida se instale. Geralmente, a CA apresenta-se de forma aguda e com altos índices de morbidade e de mortalidade. Os fatores de virulência da P. multocida envolvidos na patogenia de CA ainda não estão totalmente esclarecidos. O tratamento se dá através do uso de antimicrobianos com variação de sucesso na terapêutica. O objetivo do trabalho foi determinar o perfil de sensibilidade e de resistência antimicrobiana in vitro frente a 12 antimicrobianos e detectar dois genes candidatos à virulência (Pm0762 e Pm1231) através da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em 25 amostras de P. multocida isoladas de aves. Os resultados do antibiograma revelam que as amostras de P. multocida foram sensíveis à maioria dos antimicrobianos testados, embora tenha sido observado certo grau de resistência antimicrobiana. A maior resistência encontrada foi com a tetraciclina (8%), seguida da neomicina (4%). Os antimicrobianos amoxicilina, ampicilina, ceftiofur, doxiciclina, florfenicol, gentamicina e a combinação de sulfametoxazol + trimetoprim apresentaram 100% de sensibilidade a todas as amostras. Os resultados sugerem que alguns cuidados devem ser tomados no uso da terapia antimicrobiana. Através da técnica de PCR foi possível fazer a amplificação específica dos fragmentos dos genes Pm0762 e Pm1231 de todas as amostras. A detecção dos genes que regulam a transcrição (Pm0762 e Pm1231) merece um estudo mais aprofundado envolvendo os mecanismos de regulação molecular associados à virulência da P. multocida. A associação das duas ferramentas empregadas neste trabalho (antibiograma e PCR) poderão contribuir para um controle mais eficaz da CA e oferecer estratégias de prevenção contra a P. multocida.

The need to optimize use of available resources while maintaining the competitiveness of the poultry sector justify the use of the current system based on creating high population densities. However, the high concentration of birds per unit area makes lots more susceptible to infections by pathogens and the spread of these through different production units. These features associated with creating unsanitary conditions are primary factors for diseases such as fowl cholera (FC) caused by the bacterium Pasteurella multocida to install. Generally, the FC presents acutely and with high rates of morbidity and mortality. The virulence factors of P. multocida involved in the pathogenesis of FC are not yet fully understood. The treatment is through the use of antimicrobial agents with varying success in therapy. The objective of this study was to determine the sensitivity and antimicrobial resistance in vitro against 12 antimicrobial agents and detect two candidate genes for virulence (Pm0762 and Pm1231) by Polymerase Chain Reaction (PCR) in 25 samples of P. multocida isolated from avian. The results of susceptibility testing revealed that samples of P. multocida isolated from birds were susceptible to most antimicrobials tested, although it was observed some degree of antimicrobial resistance. The greatest resistance was found with tetracycline (8%), followed by neomycin (4%). The antibiotics amoxicillin, ampicillin, ceftiofur, doxycycline, florfenicol, gentamicin and the combination of sulfamethoxazole and trimethoprim showed 100% sensitivity for all samples. The results suggest that some care must be taken in the use of antimicrobial therapy. By PCR it was possible to specific amplification of gene fragments Pm0762 and Pm1231 of all samples. The detection of genes that regulate transcription (Pm0762 and Pm1231) deserves further study involving the molecular regulation mechanisms associated with the virulence of P. multocida. The combination of two tools used in this study (antibiogram and PCR) may contribute to more effective control of the FC and offer prevention strategies against P. multocida.