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Efeitos da fenilalanina, fenilpiruvato e alanina sobre as atividades da ATP-difosfoidrolase (EC 3.6.1.5) e 5þ-nucleotidase (EC 3.1.3.5) em sinaptossomas de córtex cerebral de ratos

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Efeitos da fenilalanina, fenilpiruvato e alanina sobre as atividades da ATP-difosfoidrolase (EC 3.6.1.5) e 5þ-nucleotidase (EC 3.1.3.5) em sinaptossomas de córtex cerebral de ratos

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Título Efeitos da fenilalanina, fenilpiruvato e alanina sobre as atividades da ATP-difosfoidrolase (EC 3.6.1.5) e 5þ-nucleotidase (EC 3.1.3.5) em sinaptossomas de córtex cerebral de ratos
Autor Berti, Simone Luisa
Orientador Wannmacher, Clovis Milton Duval
Co-orientador Sarkis, João José Freitas
Data 2000
Nível Mestrado
Instituição Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Instituto de Ciências Básicas da Saúde. Curso de Pós-Graduação em Ciências Biológicas: Bioquímica.
Assunto Alanina : Atp-difosfoidrolase : 5-nucleotidase : Sinaptossomas
Erros inatos do metabolismo : Fenilalanina : Fenilpiruvato : Alanina
Fenilalanina : Atp-difosfoidrolase : 5-nucleotidase
Fenilpiruvato : Atp-difosfoidrolase : 5-nucleotidase : Sinaptossomas
Sinaptossomas : Cortex cerebral : Ratos
Resumo Estudos anteriores realizados no Laboratório de Erros Inatos do Metabolismo demonstraram que fenilalanina (Phe) 2,0 mM ou fenilpiruvato (PP) 5,0 mM, um metabólito desaminado da Phe, reduzem a atividade da ATP-difosfoidrolase em sinaptossomas de córtex cerebral de ratos. Já estudos do efeito da Phe e do fenilactato sobre a atividade da Na+K+-ATPase, enzima envolvida na manutenção do potencial de membrana e na integridade celular no cérebro, demonstraram seus efeitos inibitórios, bem como a reversão destes efeitos pela alanina (Ala), competitivamente. Por outro lado, quando testada isoladamente, a alanina não altera a atividade da enzima. Resultados semelhantes foram observados em relação à fosforilação de proteínas de citoesqueleto neuronal na presença de Phe e/ou Ala. O presente estudo teve como principal objetivo caracterizar a inibição causada por Phe ou PP sobre a atividade da ATP-difosfoidrolase. Considerando que a ATP- difosfoidrolase participa com a 5’-nucleotidase na síntese de adenosina a partir do ATP e do ADP, decidimos investigar também os efeitos “in vitro” da Phe ou do PP sobre a atividade da 5’-nucleotidase na mesma fração. Além disso, considerando que a alanina reverte o efeito inibitório da Phe sobre algumas enzimas, decidimos investigar o efeito daquele aminoácido sobre as atividades da ATP-difosfoidrolase e da 5’-nucleotidase, bem como a possibilidade da alanina reverter efeitos inibitórios provocados pela Phe ou pelo PP sobre a atividade da ATP-difosfoidrolase. Os sinaptossomas foram preparados a partir de córtex cerebral de ratos com idade entre 25 e 35 dias para determinação das atividades da ATP-difosfoidrolase e da 5’-nucleotidase. A Phe ou o PP inibiram a atividade da ATP- difosfoidrolase em aproximadamente 20%, no entanto, a atividade da 5’-nucleotidase não foi afetada pelos dois metabólitos. Os resultados dos estudos cinéticos realizados com ATP-difosfoidrolase sugerem que ADP, Phe e PP agem sobre o mesmo sítio da enzima. A alanina não altera as atividades da ATP-difosfoidrolase e da 5’-nucleotidase e, quando testada em associação com Phe 1,5 mM ou com PP 5,0 mM, não reverteu os efeitos inibitórios provocados pelos mesmos. Considerando a importância da atividade da ATP- difosfoidrolase para a degradação do neurotransmissor ATP em sistema nervoso central, se os efeitos observados “in vitro” também ocorrerem “in vivo”, a inibição da enzima pode ser um dos mecanismos que levam ao dano cerebral característico da fenilcetonúria.
Tipo Dissertação
URI http://hdl.handle.net/10183/81888
Arquivos Descrição Formato
000283240.pdf (573.3Kb) Texto completo Adobe PDF Visualizar/abrir

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