Isolamento e caracterização das células-tronco mesenquimais provenientes do tecido adiposo e avaliação da sua viabilidade tecidual após criopreservação

Abstract

A transferência de gordura autóloga como preenchimento para a reconstrução de tecidos e órgãos é possível por meio de técnicas cirúrgicas de lipoenxertia, que se consolidaram como grandes aliadas na reconstrução das mamas após procedimentos invasivos. Esses procedimentos seguem um protocolo específico de lipoaspiração, processamento e injeção do tecido na região receptora a partir de locais naturalmente predispostos ao acúmulo do tecido adiposo, como o abdômen e a parte traseira das coxas. As adversidades enfrentadas por essa técnica se encontram na variável taxa de absorção do tecido adiposo na região doadora, que em muitos casos torna necessária a realização de novos procedimentos para o alcance de melhores resultados, e a ausência de um protocolo adequado de criopreservação desse tecido, que obriga a submissão da paciente a novas lipoaspirações para a coleta do material a ser enxertado em cada nova cirurgia de correção. Desenvolver um método adequado de criopreservação desse tecido é uma necessidade para o alcance de melhores resultados estéticos e funcionais e para a redução dos transtornos causados à paciente, portanto avaliamos a sua viabilidade após um período de criopreservação de 6 meses utilizando a trealose, um agente crioprotetor não-tóxico, seguindo um protocolo específico de lipoaspiração e processamento do tecido. Além disso, também padronizamos um protocolo de isolamento e expansão das células-tronco mesenquimais presentes no tecido adiposo para futura avaliação da sua viabilidade após criopreservação com o mesmo agente crioprotetor.

The autologous fat transfer as a filling for the reconstruction of tissues and organs is possible by means of surgical techniques of lipofilling, which are consolidated allies in the breast reconstruction surgeries after invasive procedures. These procedures follow a specific protocol for liposuction, processing and injection of tissue into the recipient region from sites naturally predisposed to the accumulation of adipose tissue, such as the abdomen and the back of the thighs. The adversities faced by this technique are found in the variable rate of absorption of adipose tissue in the donor region, which in many cases makes it necessary to perform new procedures to achieve better results, and the absence of an adequate protocol for cryopreservation of this tissue, which requires the submission of the patient to new liposuction procedures to collect the material to be injected at each new correction surgery. Develop an adequate method for cryopreservation of this tissue is necessary to reach better aesthetic and functional results and to reduce the disorders caused to the patient, therefore we evaluated its viability after a period of cryopreservation of 6 months using trehalose, a non-toxic cryoprotective agent, following a specific protocol of liposuction and tissue processing. Furthermore, we also standardized a protocol for the isolation and expansion of the mesenchymal stem cells present in the adipose tissue for future evaluation of its viability after cryopreservation with the same cryoprotectant.