Indicadores in vitro e in vivo da fertilidade de machos suínos que diferem em relação a resistência ao resfriamento das doses de sêmen

Abstract

O objetivo deste trabalho foi avaliar a fertilide de reprodutores classificados como baixa ou alta preservação em diluentes de curta ou longa ação armazenados a 17°C através de indicadores de qualidade seminal e desempenho reprodutivo. Doze machos foram classificados em baixa (BP) ou alta preservação (AP) de acordo com sua capacidade de manter a motilidade progressiva no quinto dia em diluente de curta ação e armazenados a 17°C. As doses de sêmen foram avaliadas nos dias 1, 3, 5 e 10 após a diluição. A motilidade progressiva (MP) diferiu entre as classes de machos BP e AP durante o período de seleção (P < 0,01) e também após o período de seleção (P < 0,01). Para a motilidade total (MT), houve uma interação entre classe do macho e tempo o de armazenamento (P < 0,05). Na MP, houve uma interação entre o diluente e o tempo de armazenamento (P < 0,05). No dia 10 de armazenamento, houve uma interação entre diluente e tempo de armazenamento (P < 0,05). Também houve efeito da classe de machos e do diluente para MT e MP (P < 0,01). Em avaliação de desempenho in vivo, um total de 519 porcas desmamadas foram inseminadas 24h após a indução da ovulação com triptorelina (IATF; OvuGel®). A taxa de prenhez (TPr), taxa de parto (TP) e nascidos totais (NT) não foram afetados (P > 0,05) pela interação da classe do macho e diluente quando as IA foram realizadas com doses de 24h. No entanto, os machos BP apresentaram redução dos NT em relação aos machos AP (P < 0,01). Em um grupo de 397 porcas no qual foram realizadas inseminaçãoes com doses de 24 ou 72 h, foi observada uma interação (P < 0,05) entre a classe do macho e tempo de armazenamento para NT. A proteômica do plasma seminal (PS) de reprodutores AP e BP em um estudo adicional, onde foram identificadas 257 proteínas. Para ambas categorias de machos se observou 184 proteínas do PS semelhantes entre os grupos, porém, os machos BP e AP apresentaram 41 e 32 proteínas PS considerandas exclusivas, respectivamente. Dez proteínas foram expressas diferencialmente (FC ≥ 1,5). Cinco proteínas (SPMI, ZPBP1, FN1, HPX e C3) foram associadas aos machos AP e outras cinco proteínas (B2M, COL1A1, NKX3-2, MPZL1 e KRT1) foram associadas aos machos BP. Em um estudo aplicado, reprodutores suínos AP foram previamente classificados pela motilidade total e o desepenho desses machos com o uso de doses de até 7 dias foi avaiado em condições de campo. Nesse estudo, dois grupos experimentais foram formados com doses de sêmen armazenadas entre um e três dias, e outro com doses de sêmen armazenadas entre cinco e sete dias. O TPr, a TP e os NT não diferiram (P > 0,05) entre os grupos. Em conclusão, os machos classificados como AP mantiveram os parâmetros de cinética e motilidade acima dos valores mínimos por 10 dias de armazenamento, independentemente do diluente utilizado. A classe BP demonstrou diminuição de NT. Além disso, os NT foram reduzidos quando uma única IATF usando doses de sêmen de machos de baixa preservação armazenadas por 72 h foi utilizada. Além disso, dez proteínas SP poderiam ser potenciais biomarcadores para preservação das doses de sêmen e indiretamente com a fertilidade. Ainda, em condições práticas de campo, o uso de doses de sêmen de machos selecionados pela capacidade de preservação quando diluídas em diluentes de longa ação e armazenadas por até sete dias não prejudicou o desempenho reprodutivo.

The aim of this study was to evaluate the fertility of boars classified as low and high-preservation diluted in short- or long-term extenders during storage at cooling at 17ºC through indicators of seminal quality and reproductive performance. Twelve boars were classified in low (LP) or high preservation (HP) according to their capability in maintaining progressive motility in the fifth day in short-term extenders and stored at 17°C. The semen doses were evaluated on day 1, 3, 5 and 10 after dilution. Progressive motility (PM) differed between LP and HP boars during the selection period (P < 0.01) and also after the selection period (P < 0.01). In TM, there was an interaction between boar class and storage time (P < 0.05). In PM, there was an interaction between extender and time of storage (P < 0.05). At day 10 of storage, there was an effect of boar class and extender in TM and PM (P < 0.01). For the trial in vivo, a total of 519 weaned sows were single inseminated 24 h after ovulation induction with triptorelin (FTAI; OvuGel®). The pregnancy rate (PR), farrowing rate (FR), and the total number of piglets born (TPB) were not affected (P > 0.05) by the interaction of the boar class and extender when the AI were performed with semen doses at 24h. However, LP boars presented a reduction of TPB compared to HP boars (P < 0.01). In a group of 397 sows (storage time at insemination 24 or 72 h) it was observed an interaction (P < 0.05) between the class of boar and storage time for TPB. The proteomic was evaluated in seminal plasma of HP and LP boars, in which 257 proteins were identified. For both classes of boars,184 similar SP proteins were observed. However, the class of boars LP and HP had 41 and 32 SP proteins considered exclusive, respectively. Among similar proteins, ten proteins were differentially expressed in the two groups (FC ≥ 1.5). Five proteins (SPMI, ZPBP1, FN1, HPX, and C3) were associated with HP and the other five proteins (B2M, COL1A1, NKX3-2, MPZL1 and KRT1) were associated with LP boars. In an additional study, the boars were classified by total motility, only boars that were considered as HP were used. After, two groups were formed with semen doses stored between one and three days, and with semen doses stored between five and seven days. The PR, FR and TPB did not differ (P > 0.05) between the groups. In conclusion, the boars classified as HP maintained sperm motility and kinetics parameters above the minimum values for 10 days of storage regardless of the extender used. Besides that, single insemination of sows with semen doses with 72 h of storage from low-preservation boars reduced TPB. The LP boars had a reduced TPB. Also, 10 SP proteins could be potential biomarkers for boar semen preservation and indirectly with fertility. The use of semen doses diluted in long-term extender and stored for up to seven days did not impair the reproductive performance.